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如何有效的檢測肉類產品中β-興奮劑(萊克多巴胺)的殘留量

日期:2017-8-11 11:57:27

  近日,世界體壇再現興奮劑丑聞,經過將近一年的調查證實,某國存在大規模使用興奮劑、以確?;蛱岣哌\動員及運動隊成績的作弊行為,這些行為由官員、工作人員和運動員本身實施。提及體壇中的“興奮劑”事件,估計很多人都不會感到陌生:曾戰勝晚期癌癥的“環法七冠王”蘭斯·阿姆斯特朗、“短跑女王”馬里昂·瓊斯,短跑巨星蒂姆·蒙哥馬利,他們曾經的光輝生涯都因興奮劑丑聞而結束。



  興奮劑在英語中稱“Dope”,是國際社會對禁用藥物的一個習慣性統稱,興奮劑并不都具有興奮性(如利尿劑),甚至有的還具有抑制性(如β-阻斷劑)。國際奧委會已經規定的屬于興奮劑的部分藥品有:氯三苯乙烯、硝酸甘油、皮質類固醇、蛋白合成類固醇、諾龍、促紅細胞生成素、睪丸素、支氣管擴張劑、蛋白合成激素、苯乙酸諾龍等。使用興奮劑,將對人的生理、心理產生極大的危害,使服用者心力衰竭、激動狂躁,成年女性男性化,男子過早禿頂,前列腺炎,前列腺肥大,患糖尿病,心臟病等,嚴重損害人的身心健康。
  曾經,西馬特羅、特布他林、克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、多巴胺6種β-興奮劑,一度被廣泛應用于動物養殖中,現在新的規定則禁止所有的β-興奮劑藥物在動物養殖中使用。目前,在肉類市場上,商品豬生產者為了高效率地生產出瘦肉率高、質量好的豬肉來跟其他的動物產品競爭,興奮劑的使用仍有存在。采用液相色譜法檢測動物組織中萊克多巴胺的含量,不僅成本低,而且操作簡便、精密度高、檢出限低、回收率高、重現性較好。
  儀器介紹
  LC-3000等度智能全控液相色譜系統由1臺P3000高壓恒流泵與1臺UV3000紫外檢測器直接構成等度分析系統。使用CXTH-3000工作站可以同時控制數臺P3000高壓恒流泵、UV3000紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
  樣品處理:
(1)制備:稱取5.0g絞碎均勻的樣品于50mL離心管中,加人250μL 0.20μg/mL萊克多巴胺標準工作液,放置在冰箱中過夜,隔日取出,待恢復到常溫后,加入20mL乙腈,渦旋3min,在65℃水浴中用JL-120超聲波清洗器(南京科捷分析儀器有限公司)提取30min,冷卻后8000r/min離心10min,分出上層清液,樣品重復加乙腈15mL,提取兩次,合并上清液于125mL分液漏斗中,加入30mL正己烷,于分液漏斗震蕩器上220r/min搖震8min,靜置1h,下層乙腈相流入50mL燒杯中。在分液漏斗中加入5mL正己烷,在分液漏斗震蕩器上以220r/min搖震4min,靜置20min,合并下層乙腈,在60℃水浴鍋中用氮氣吹至近干,加入8mL 100mmol/L鹽酸溶液(用氫氧化鈉調節pH=2.0),8000r/min離心10min,取上層清液進行凈化。
(2)凈化:依次用5mL甲醇、5mL水和5mL 30mmol/L鹽酸對LC-SCX小柱進行活化,然后將制備的上層清液加到小柱中,待樣品完全過柱后,依次用5mL水和5mL甲醇淋洗柱子,除去雜質,最后用10mL 4%氨化乙酸乙酯洗脫,收集洗脫液,將其在50℃水浴中用氮氣吹至近干,用甲醇定容至1mL,經濾膜過濾后待測。

所屬類別: 司法鑒定

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